milieu de culture : CLED principe, composition et lecture...

Définition :

La gélose Cystine Lactose Electrolyte Deficient ou CLED est un milieu de culture non sélective utilisée pour l’isolement, numération et différenciation des microorganismes urinaires (très fréquemment) dans le domaine de biologie médicale. Etant un milieu non sélectif de nombreuses bactéries, tant Gram + que Gram -, pourront se développer.

Principe : La fermentation du lactose en acide est mise en évidence par le virage du vert au jaune de l’indicateur de pH, le bleu de bromothymol.  La cystine favorise la croissance des coliformes donnant habituellement de petites colonies sur d’autres milieux. L’absence d’électrolytes (pas de NaCl) limite le phénomène d’envahissement par les Proteus. Composition : Peptones Extrait de viande Hydrolysât trypsique de caséine L-cystine (la L-cystine est un acide aminé soufré) Lactose Bleu de Bromothymol (indicateur de pH) Agar Eau distillée (qsp) 4g 3g 4g 0,128g 10g 0,002g 15g 1L Préparation : Homogénéiser la poudre contenue dans le flacon. Mélanger 34,2 grammes de milieu déshydraté dans un litre d’eau distillée stérile jusqu’à l’obtention d’une suspension homogène. Chauffer lentement, en agitant fréquemment, puis porter à ébullition jusqu’à dissolution complète. Stériliser à 121°C pendant 15 minutes. Répartir en boîtes de Petri ou en flacons. Lecture des Résultats : Après la culture d’échantillon à tester par ensemencement sur CLED, la lecture s'effectue après 18 à 24 heures d'incubation à 37°C.

On dit :

Lactose + si les bactéries apparaissent jaunes.

 Lactose –  si les bactéries apparaissent bleues vertes.