I-Techniques bi-phasiques (physico-chimique):
1-M.I.F concentration
Le
but :
Cette technique permet d'augmenter la sensibilité de la
recherche de formes kystiques ou d'œufs.
Les formes végétatives ne peuvent plus être mises en évidence après concentration.
Les formes végétatives ne peuvent plus être mises en évidence après concentration.
Matériels et réactifs :
·
Centrifugeuse
·
Microscope : objectifs 10 x 40 Flacon ou
grand tube
·
Applicateur en bois ou anse
·
Passoire ou gaze
·
Entonnoir
·
Tubes coniques à centrifuger gradués (au
moins 15 ml)
·
Bouchons ou parafilm
·
Lames et lamelles
· Crayon marqueur.
Procédure :
1. Mélanger dans un flacon bien bouché une partie
de selles pour 10 parties de solution MIF
2. Bien agiter
3. Faire un examen direct : prendre une goutte
de la solution obtenue après mélange et examiner entre lame et lamelle.
4. Si l’examen direct est négatif
5. Mélanger a nouveau en agitant le flacon
6. Laisser décanter
7. Verser le surnageant dans un tube à centrifuger.
8. Ajouter l’éther sulfurique (1/3) en prenant la
précaution de laisser au moins un centimètre de hauteur vide dans le tube.
9. Agiter vigoureusement jusqu'à émulsion complète
après avoir bouché le tube avec le pouce
10. Laisser décanter 2 min environ. L’émulsion doit rester stable.
11. Centrifuger immédiatement après l’émulsion pendant une minute à
2000 t.
12. Jeter le surnageant et prélever le culot par capillarité avec une
pipette pasteur.
Si après deux minutes de décantation l’émulsion instable
(présence d’éther surnageant) il faudra ajouter un ml d’eau du robinet agiter
et laisser décanter. Cette opération pourra être répéter autant de
fois que l’on constatera la présence d’éther surnageant.
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