Définition :
La
coloration de MGG est une méthode de coloration utilisée
en hématologie pour différencier et compter les différentes
populations de cellules sanguines dans des préparations cellulaires
(cytologie).
May-Grünwald
Giemsa est
réalisée classiquement sur :
- des frottis sanguins
- des myélogrammes ( moelle osseuse ).
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| frottis sanguin |
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| frottis de moelle osseuse |
mode opératoire :
Avant de commencer notre coloration
il faut d'abord faire un dilution
de 1/10 pour solution Giemsa
avec de l’eau distillé
c.à.d. 1 volume de solution Giemsa
avec 9 volumes de l’eau distillé.
Le
volume finale(Vf) ×
le facteur de dilution (ici 1/10)
= le volume de
solution à dilué(Vs)
Le
volume de diluant (ici l’eau distillé) =
Vf- Vs
Si
on va faire un volume finale de 400 ml les volumes doit être :
40
ml de
giemsa
+ 360
ml de
l’eau distillé.
Après
l’ étalement soit du sang (frottis sanguin) ou de la moelle osseuse sur une
lame (un myélogramme ) et après séchage :
premier colorant : May-Grunwald
- recouvrir notre lame par cet colorant pendant 3 min puis on rincer avec l'eau.
deuxième colorant : Giemsa
- après de faire un dilution de 1/10 on recouvrir notre lame par Giemsa pendant 20 min
- rincer avec l'eau et laisser sécher
- observer à l'objet 100 avec huile d’immersion
Observation :
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| observation microscopique de la moelle osseuse |
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| observation microscopique du frottis sanguin 1: plaquettes 2: globule rouge 3: monocyte 4: polynucléaire neutrophile 5: lymphocyte |
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