Le milieu de Kligler est un milieu complexe car il permet la
recherche de plusieurs caractères biochimiques qui sont les suivantes :
- La fermentation du lactose et du glucose
- Production de gaz
- La production de sulfure d’hydrogène. (H2S).
Principe :
Les fermentations du lactose et du glucose, se traduisent par une
acidification qui fait virer au jaune le rouge de phénol (indicateur pH).
Les micro-organismes qui fermentent le glucose, mais pas le lactose (salmonelles ou shigelles), produisent initialement une pente jaune due à l’acidification obtenue par fermentation du glucose présent en faible quantité. Lorsque le glucose est complètement utilisé dans l’environnement aérobie de la pente, la réaction s’alcalinise par oxydation des acides produits, phénomène aboutissant à l’apparition d’une coloration rouge en surface. Cette alcalinisation n’apparaît pas en profondeur dans le culot, où la coloration se maintient au jaune.
Les germes fermentant le lactose et le glucose font virer au jaune la pente et le culot par une production importante d’acide, ce qui suffit à maintenir un pH acide en surface.
Les micro-organismes ne fermentant aucun des deux glucides ne modifient pas la couleur du milieu.
La production d’H2S se manifeste dans le culot par l’apparition d’une coloration noire de sulfure de fer qui est due à la réduction du thiosulfate en présence de citrate ferrique.
La production de gaz (H2, CO2), résultant des fermentations sucrées, se traduit par l’apparition de bulles ou bien par la fragmentation de la gélose.
Les micro-organismes qui fermentent le glucose, mais pas le lactose (salmonelles ou shigelles), produisent initialement une pente jaune due à l’acidification obtenue par fermentation du glucose présent en faible quantité. Lorsque le glucose est complètement utilisé dans l’environnement aérobie de la pente, la réaction s’alcalinise par oxydation des acides produits, phénomène aboutissant à l’apparition d’une coloration rouge en surface. Cette alcalinisation n’apparaît pas en profondeur dans le culot, où la coloration se maintient au jaune.
Les germes fermentant le lactose et le glucose font virer au jaune la pente et le culot par une production importante d’acide, ce qui suffit à maintenir un pH acide en surface.
Les micro-organismes ne fermentant aucun des deux glucides ne modifient pas la couleur du milieu.
La production d’H2S se manifeste dans le culot par l’apparition d’une coloration noire de sulfure de fer qui est due à la réduction du thiosulfate en présence de citrate ferrique.
La production de gaz (H2, CO2), résultant des fermentations sucrées, se traduit par l’apparition de bulles ou bien par la fragmentation de la gélose.
Composition :
en g/l d’eau distillée :
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Extrait de viande de bœuf
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3g
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Extrait de levure
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3g
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Peptone (riche en lysine)
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20g
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NaCl
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5g
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Citrate ferrique
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0,3g
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Thiosulfate de sodium
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0,3g
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Lactose
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10g
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Glucose
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1g
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Rouge de phénol (solution à 1%)
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5mL
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Agar
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12g
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Eau distillée (qsp)
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1L
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Lecture :
Fermentation du lactose
Pente inclinée rouge : lactose non fermenté(1)
Pente inclinée jaune : lactose fermenté(2)
Fermentation du glucose
Culot rouge : glucose non fermenté(3)
Culot jaune : glucose fermenté(4)
Production de gaz
Apparition de bulles de gaz dans le culot
Formation d’H2S
Production d’une coloration noire entre le culot et la pente ou le
long de la piqûre.
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| lecture des résultats sur Kligler |
A : Témoin
B : glucose -, lactose+ , H2S -, pas de production de gaz.
C : glucose+, lactose -, H2S -, pas de production de gaz.
D : glucose+, lactose +, H2S -, avec production de gaz.
E : glucose+, lactose -, H2S +, pas de production de gaz.
source d'image :www.docplayer.es
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